Zlecenie 7926579 - Platforma Startowa „Wschodni Akcelerator Biznesu” ...

   
Zamówienie 7926579 (zakończone)
źródło Internet
data publikacji 2021-01-19
przedmiot zlecenia
Platforma Startowa „Wschodni Akcelerator Biznesu”

Przedmiotem zamówienia jest realizacja usługi specjalistycznej polegającej na
przeprowadzenie badania wpływu preparatu SANVERUM na toksyczność oraz działanie antybakteryjne embrionów kurzych oraz kaczych. SZCZEGÓŁOWY ZAKRES ZAMÓWIENIA 1. Zbadanie bezpieczeństwa działania związku w teście błony omoczniowo kosmówkowej zarodka kurzego Potencjalne toksyczne działanie środka SANVERUM na organizmy żywe będzie testowane na zarodkach kurzych metodą HET CAM. Polega ona na nakropieniu na uprzednio wypreparowaną błonę omocznio-kosmówkową żywego 8-10 dniowego zarodka kurzego roztworu badanej substancji a następnie ocenie toksyczności w skali 21 punktowe, na podstawie obserwacja czasu i stopnia wystąpienia przekrwienia, wylewów i koagulacji naczyń krwionośnych tej błony (Luepke 1985) . Test ten jest szybki (trwa do 5 minut), w ok 80% zgodny z testem Draiza (Mystkowska-Bączkowska et al. 1995) i nie wymaga zgody Komisji etycznej. Kurze jaja wylęgowe (500 szt.) pochodzące od stada rodzicielskiego kur zakupione z fermy rodzicielskiej. Jaja będą inkubowano w aparatach lęgowych typu Mesalles 65 w temperaturze (T) 37,8°C i wilgotności względnej (RH) 50% przez 9 dni. Po tym czasie zostanie przeprowadzono świetlenie podczas którego wybrakowaniu ulegną jaja niezapłodnione, uszkodzone i zawierające zamarłe zarodki. Do testu HET CAM przeznaczono tylko jaja z prawidłowo rozwijającymi się zarodkami. Test wykonany zostanie zgodnie z procedurą ICCVAM (2010). W celu wykonania testu w skorupie nieuszkodzonego kurzego jaja wylęgowego, zawierającego prawidłowo rozwijający się zarodek w 9 dobie inkubacji, wykonany zostanie nad komorą powietrzną otwór o średnicy ok 20 mm. Na odsłoniętą w ten sposób błonę podskorupową wewnętrzną (ang. internal egg shell membrane, IESM) nakropiony będzie 1 mL 0,9% NaCl w celu jej nawilżenia i zmiękczenia. Odczekaniu ok. 20 minut, pozostały płyn fizjologiczny zostanie odpipetowany, a następnie ostrożnie aby nie uszkodzić naczyń włosowatych, usunięta IESM odkrywając błonę omoczniowo-kosmówkową (ang. chorioallantoic membrane, CAM). Do testu zostaną użyte tylko jaj o nieuszkodzonej podczas preparowania sieci naczyń włosowatych CAM. Na tak wypreparowaną błonę omocznio-kosmówkową (CAM) nakropione zostanie 200 μl wodnego roztworu badanego preparatu (roztwory . SANVERUM w stężeniu 3 i 0,6% w wodzie destylowanej oraz wodzie kranowej) Po nakropieniu roztworu, powierzchnia CAM będzie obserwowana przy pomocy lupy oraz rejestrowany czas wystąpienia uszkodzeń i ta tej podstawie oceniane działanie drażniące preparatów zgodnie z 21 punktową skalą Luepke (1985) substancji (roztworu) (Tab. 3). Dokumentacje fotograficzna zostanie wykonano przy pomocy aparatu Canon EOS 600D + Obiektyw: Canon EF 50mm f/1.8 STM z pierścieniem pośrednim 21mm. 2. Zbadanie wpływu podanie preparatu SANVERUM in ovo na rozwój zarodka kurzego Dawka SANVERUM uznana za bezpieczną w teście CAM HET zostanie nakropiona na błonę podskorupową wewnętrzna (IESM), jaja w następujących fazach rozwojowych zarodków: 1) Przed rozpoczęciem inkubacji; 2) 6 doba inkubacji; 12 doba inkubacji; 17 doba inkubacji. Posłużenie się zarodkami kurzymi nie wymaga zgody Komisji Etycznej ds. Doświadczeń na Zwierzętach. Nakropienie substancji IESM nie wiąże się z uszkodzeniem struktury jaja i/lub błon płodowych oraz zranieniem zarodka. Doświadczenie będzie miało na celu zweryfikowanie następujących hipotez badawczych: 1) Sanverum przenika przez błonę podskorupową wewnętrzna do treści jaja, więc może zostać wykorzystany jako nośnik innych substancji lub probiotyków 2) Sanverum podana na błonę podskorupową wewnętrzna nie zakłóca rozwoju embrionalnego; Różne terminy iniekcji in ovo będą miały na celu określenie przydatności Sanverum do różnego typu doświadczeń: 1) Iniekcja przed rozpoczęciem inkubacji lub w 6 dobie inkubacji pozwoli na wykorzystanie SANVERUM jako nośnika w badaniach embriologicznych. SANVERUM jako nośnik pozwoli wprowadzić inne substancje do jaja we wczesnej fazie embriogenezy 2) Iniekcja w 12 lub 17 dobie inkubacji na wykorzystanie SANVERUM w procedurze dożywiana zarodka w jaju(in ovo feeding) lub podania probiotyków czyli jako nośnika w substancji stymulujących rozwój układu immunologicznego i/lub oraz pokarmowego, a w efekcie stymulującego wzrost piskląt w pierwszych dwóch tygodniach po wykuciu. Tabela 1. Układ doświadczenia 2 Grupa Liczba powtórzeń (tac) Jaj na tacę Razem jaj Jaja niemanipulowane (kontrola 3 90 270 Iniekcja przed inkubacją 3 90 270 Iniekcja w 6 dobie 3 90 270 Iniekcja w 12 dobie 3 90 270 Iniekcja w 17 dobie 3 90 270 Razem 15 90 1350 3. Testowanie aktywności przeciwdrobnoustrojowej in vivo SANVERUM Powierzchnia skorup świeżych jaj kurzych zostanie opryskana przed inkubacją roztworem SANVERUM w 2 stężeniach: 0,6% oraz dodatkowo 3% dostarczonych prze firmę. Jako kontrolę potraktuje się grupę skorupek jaj traktowana wodą destylowaną. Po ok 60 minutach po dezynfekcji pobrane zostaną wymazy ze skorupek jaj z 3 cm2 powierzchni od 6 skorup jaj z każdej grupy. Wymazy ponowi się po 7 dniach inkubacji jaj w celu stwierdzenia długotrwałości przewidywanego efektu bakteriostatycznego preparatu. Wszystkie próbki będą następnie hodowano na określonych podłożach w celu identyfikacji bakterii. Zastosuje się pożywkę z agarem i z krwią owczą (5%). N tej podstawie wyhodowane zostaną różnych gatunki bakterii zasiedlających skorupy Następnie izolaty hodowano przez 24 godziny w 37°C. Kultury te wykorzystane będą do analizy morfologicznej kolonii i standardowej identyfikacji fenotypowej. Jaja pozostaną w inkubatorach do wylęgu w celu określenia działania preparatów na wylęgowość. Tabela 2. Schemat doświadczenia 3. Grupa Liczba powtórzeń (tac) Jaj na tacę Wymaz przed inkubacją Wymaz po 7 dobie inkubacji Razem wymazów Jaja nie opryskiwane (kontrola) 1 90 6 6 12 Jaj opryskane wodą destylowaną (kontrola pozytywna) 1 90 6 6 12 0,3% Sanverum 1 90 6 6 12 3% Sanverum 1 90 6 6 12 Razem 15 360 24 24 48 4. Badanie zjadliwości bakterii E. coli poddanych działaniu preparatu SANVERUM na rozwój zarodkowy Celem badań będzie określenie czy preparat SANVERUM zahamuje namnażanie się bakterii w jajach z rozwijającymi się zarodkami. Jaja kurze wylęgowe podzielone pochodzące od stada rodzicielskiego podzielone zostanie na cztery grupy badawcze (60 jaj/grupę) i inkubowane przez 9 dni w standardowych warunkach. W E9 przeprowadzano iniekcję 100µl zawiesiny bakterii E.coli (w stężeniu 105CFU mg/ml o raz E. coli traktowane SANVERUM). do worka owodniowego jaja z prawidłowo rozwijającymi się zarodkami (Tabel 3). Przed iniekcją powierzchnię skorupy jaj od strony komory powietrznej zostaną zdezynfekowane 70% roztworem alkoholu etylowego, a następnie przy pomocy igły o grubości 1,2 mm wykonywano w tym miejscu otwór. Iniekcje zawiesin będzie wykonywano przy pomocy igły o średnicy 0,5 mm, a dozowano przy pomocy strzykawek insulinowych o pojemności 1 ml. Po zakończonej iniekcji otwór w każdym jaju zalepiono woskiem, i inkubacja była kontynuowana. Po upływie 72 godzin od zakończenia iniekcji, wszystkie jaja zostaną prześwietlone lampą ovoskopową odrzucając jaja z zamarłymi zarodkami, rozpoznawanymi na podstawie widocznych w świetle halogenowym uszkodzeniach struktury naczyń krwionośnych omocznio-kosmówki. Jaja wybrakowane zostaną poddane analizie embriopatologicznej w celu ustalenia fazy rozwojowej zarodka w momencie śmierci., natomiast inkubacja jaj z żywymi zarodkami będzie kontynuowana. W E19, w momencie rozpoczęcia przed rozpoczęciem wykluwania wewnętrznego piskląt, doświadczenie zostało zakończone. Wszystkie jaja zostały otwarte, a żywe zarodki poddane eutanazji przez dekapitację. Tabela 3. Schemat doświadczenia 4. Grupa Liczba powtórzeń (tac) Jaj na tacę Jaja nieiniekowane 1 60 Jaj iniekowane Senverum (kontrola pozytywna) 1 60 Zawiesina E.coli 105CFU mg/ml (kontrola negatywna) 1 60 Zawiesina E.coli +Sanverum 1 60 Razem 15 240 5. Sporządzenie pisemnego raportu z wykonanych badań Raport powinien zawierać podłoże naukowe określające stan poznania tematyki zawartych w zagadnieniach przedmiotu zamówienia, obiektywne analizy wyników, potwierdzone testami statystycznymi wraz z ich interpretacją, a także dyskusja otrzymanych wyników badań. Zamawiający zastrzega sobie również prawo do użytkowania „żywych” danych (załączonych w plikach arkusz kalkulacyjnego Excel) z otrzymanych eksperymentów w celu ich późniejszego przetwarzania i użytkowania. 6. Celem przeprowadzonych badań jest: Celem niniejszych eksperymentów jest określenie w warunkach in vivo poziomu toksyczności substancji czynnych zawartych w Sanverum, a także ich wpływ na rozwój zarodków kurzych i skuteczność działania antybakteryjnego jako alternatywy dla antybiotykoterapii.
branża Laboratoria
podbranża usługi laboratoryjne
kody CPV 73111000
forma zapytanie ofertowe
typ zlecenia usługi, wykonanie
kraj realizacji Polska
województwo realizacji Lubelskie
kraj organizatora Polska
województwo organizatora Lubelskie

Zamieszczone dane to tylko fragment informacji – aby uzyskać dostęp aktywuj darmowy test lub zaloguj się

WYŚWIETL PODOBNE ZAMÓWIENIA Z BRANŻY: usługi laboratoryjne

       
nr Termin Organizator Przedmiot
10365199 2024-03-29
godz. 10:00
Śląskie Analiza wody pitnej w TAURON Wytwarzanie S.A. – Oddział Elektrownia Siersza w Trzebini
10345115 2024-03-29
godz. 23:59
Mazowieckie Ogłoszeniodawca wynajmie powierzchnię laboratoryjną. Pomieszczenia muszą spełniać następujące wymagania: 1) Powierzchnia laboratoryjna powinna posiadać możliwość regulacji i utrz...
10290820 2024-04-02
godz. 23:59
Pomorskie Część 1: 1. Przedmiotem zamówienia jest usługa pozyskania materiału biologicznego (mocz) wraz z danymi medycznymi pacjentów do prowadzenia badań w ramach eksperymentu badawczego, kt...
10283446 2024-04-03
godz. 09:00
Mazowieckie 1. Przedmiotem zamówienia jest usługa przeprowadzenia i monitorowania niekomercyjnego badania klinicznego 2. Zamawiający nie dopuszcza składanie ofert częściowych. 3. Szczegółowy opi...
10319693 2024-04-03
godz. 14:00
Świętokrzyskie Obsługa stałych paliw wtórnych: dostawy, pobór i przygotowanie prób -
10340215 2024-04-03
godz. 18:00
Mazowieckie obsługa sieci stacji paliw Amic w zakresie badania wód podziemnych (piezometrów), wody pitnej, wody z ujęć, ścieków przemysłowych, wód opadowych i roztopowych
10318817 2024-04-12
godz. 23:59
Małopolskie 1. Przedmiotem zamówienia jest świadczenie na rzecz Zamawiającego usług w charakterze TECHNICAL AUDIO DESIGNER. W ramach niniejszego postępowania Zamawiający przewiduje wyłonienie Wyk...
10329867 2024-04-17
godz. 23:59
Małopolskie 1. Przedmiotem zamówienia jest świadczenie na rzecz Zamawiającego usług w charakterze TECHNICAL VFX ARTIST. W ramach niniejszego postępowania Zamawiający przewiduje wyłonienie Wykonaw...
10331256 2024-04-17
godz. 23:59
Śląskie W związku z planowaną realizacją projektu pn.: „Opracowanie i wdrożenie innowacyjnego sposobu żywienia psów w oparciu o nowej generacji jadalne opakowania biopolimerowe”, realizowa...
10376440 2024-04-26
godz. 23:59
Wielkopolskie Przedmiotem zamówienia jest świadczenie usług programistycznych w charakterze AI Engineer 1 w ramach projektu pt. Opracowanie opartego na sztucznej inteligencji systemu do automatycznej i...